彩虹养生网精选:
- 1、融合蛋白gfp需要添加atg吗
- 2 、什么是融合蛋白
融合蛋白gfp需要添加atg吗
1▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍、这个分情况而定:如果GFP添加融合在目标蛋白N端,则需带有ATG ,且融合时去掉GFP蛋白的终止密码子;如果融合在目标蛋白C端,则可带也可不带ATG 。
2、克隆基因的编码框时,必须从ATG开始或UTR处开始。当你想表达这个基因时 ,PCR产物必须包括完整的读码框;当你需要该基因融合GFP时,不仅需要从ATG开始,终止密码子必须突变掉 ▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍,而且目的基因与GFP必须在一个读码框中。
3 、在荧光显微镜下采用GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬形成 由于电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成,人们利用LC3在▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了此技术 。
4、末端如果有差异▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍的话 ,可以把基因的ATG(甲硫氨酸)的5`末端替换1-2个碱基(变成GTG或者GCG这样),从第二个氨基酸序列开始完全一致即可。而配合扩增和酶切的话,插入片段是允许有3▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍`末端的冗余。
什么是融合蛋白
1、融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物 。另一种含义就是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白 ,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。
2 、融合蛋白是指在基因工程迅速发展的基础上,通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接 ,由同一调控序列控制构成的基因表达后所得的蛋白质产物 。融合蛋白技术是为获得大量标▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌▍准融合蛋白而进行的有目的性的基因融合和蛋白表达方法。
3、CTLA4-Ig融合蛋白CTLA4融合蛋白就是用来调节T细胞功能的,就是要产生免疫抑制的。之所以采用融合形式是因为CTLA4 分子在T 细胞中的表达与分布非常特殊,绝大多数分子表达在胞内 ,且呈极性分布于高尔基体的成熟面,而对胞内段改构能使该分子由胞内表达变为胞外分泌性表达。